ਓਸਟੀਓਆਰਥਾਈਟਿਸ (OA) ਹੱਡੀਆਂ ਦੇ ਜੋੜਾਂ ਦੀਆਂ ਲੰਬੇ ਸਮੇਂ ਦੀਆਂ ਪੁਰਾਣੀਆਂ ਡੀਜਨਰੇਟਿਵ ਬਿਮਾਰੀਆਂ ਵਿੱਚੋਂ ਇੱਕ ਹੈ ਜੋ 65 ਸਾਲ ਤੋਂ ਵੱਧ ਉਮਰ ਦੀਆਂ ਆਬਾਦੀ ਨੂੰ ਪ੍ਰਭਾਵਿਤ ਕਰਦੀ ਹੈ [
1]. ਆਮ ਤੌਰ 'ਤੇ, OA ਮਰੀਜ਼ਾਂ ਨੂੰ ਖਰਾਬ ਕਾਰਟੀਲੇਜ, ਸੋਜਸ਼ ਵਾਲੇ ਸਾਇਨੋਵੀਅਮ, ਅਤੇ ਖੋਰੇ ਹੋਏ ਕਾਂਡਰੋਸਾਈਟਸ ਦਾ ਪਤਾ ਲਗਾਇਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਜੋ ਦਰਦ ਅਤੇ ਸਰੀਰਕ ਪਰੇਸ਼ਾਨੀ ਦਾ ਕਾਰਨ ਬਣਦੇ ਹਨ [
2]. ਗਠੀਏ ਦਾ ਦਰਦ ਮੁੱਖ ਤੌਰ 'ਤੇ ਜੋੜਾਂ ਵਿੱਚ ਸੋਜਸ਼ ਦੁਆਰਾ ਉਪਾਸਥੀ ਦੇ ਪਤਨ ਕਾਰਨ ਹੁੰਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ ਜਦੋਂ ਉਪਾਸਥੀ ਨੂੰ ਗੰਭੀਰ ਰੂਪ ਵਿੱਚ ਨੁਕਸਾਨ ਪਹੁੰਚਦਾ ਹੈ ਤਾਂ ਹੱਡੀਆਂ ਇੱਕ ਦੂਜੇ ਨਾਲ ਟਕਰਾ ਸਕਦੀਆਂ ਹਨ ਜਿਸ ਨਾਲ ਅਸਹਿ ਦਰਦ ਅਤੇ ਸਰੀਰਕ ਕਠਿਨਾਈ ਹੋ ਸਕਦੀ ਹੈ [
3]. ਜੋੜਾਂ ਦੇ ਦਰਦ, ਸੋਜ ਅਤੇ ਕਠੋਰਤਾ ਵਰਗੇ ਲੱਛਣਾਂ ਦੇ ਨਾਲ ਸੋਜਸ਼ ਵਿਚੋਲੇ ਦੀ ਸ਼ਮੂਲੀਅਤ ਚੰਗੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਦਸਤਾਵੇਜ਼ੀ ਹੈ। OA ਮਰੀਜ਼ਾਂ ਵਿੱਚ, ਸੋਜਸ਼ ਵਾਲੇ ਸਾਈਟੋਕਾਈਨ, ਜੋ ਕਿ ਕਾਰਟੀਲੇਜ ਅਤੇ ਸਬਕੌਂਡਰਲ ਹੱਡੀ ਦੇ ਖੋਰੇ ਦਾ ਕਾਰਨ ਬਣਦੇ ਹਨ, ਸਾਇਨੋਵੀਅਲ ਤਰਲ ਵਿੱਚ ਪਾਏ ਜਾਂਦੇ ਹਨ [
4]. OA ਦੇ ਮਰੀਜ਼ਾਂ ਨੂੰ ਆਮ ਤੌਰ 'ਤੇ ਦੋ ਮੁੱਖ ਸ਼ਿਕਾਇਤਾਂ ਹੁੰਦੀਆਂ ਹਨ ਦਰਦ ਅਤੇ ਸਾਇਨੋਵੀਅਲ ਸੋਜਸ਼। ਇਸ ਲਈ ਮੌਜੂਦਾ OA ਥੈਰੇਪੀਆਂ ਦੇ ਮੁੱਖ ਟੀਚੇ ਦਰਦ ਅਤੇ ਸੋਜਸ਼ ਨੂੰ ਘਟਾਉਣਾ ਹਨ। [
5]. ਹਾਲਾਂਕਿ ਉਪਲਬਧ OA ਇਲਾਜ, ਜਿਨ੍ਹਾਂ ਵਿੱਚ ਗੈਰ-ਸਟੀਰੌਇਡਲ ਅਤੇ ਸਟੀਰੌਇਡਲ ਦਵਾਈਆਂ ਸ਼ਾਮਲ ਹਨ, ਨੇ ਦਰਦ ਅਤੇ ਸੋਜ ਨੂੰ ਘਟਾਉਣ ਵਿੱਚ ਪ੍ਰਭਾਵਸ਼ੀਲਤਾ ਸਾਬਤ ਕੀਤੀ ਹੈ, ਇਹਨਾਂ ਦਵਾਈਆਂ ਦੀ ਲੰਬੇ ਸਮੇਂ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਦੇ ਗੰਭੀਰ ਸਿਹਤ ਨਤੀਜੇ ਹਨ ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਕਾਰਡੀਓਵੈਸਕੁਲਰ, ਗੈਸਟਰੋ-ਇੰਟੇਸਟਾਈਨਲ, ਅਤੇ ਗੁਰਦੇ ਦੀਆਂ ਨਪੁੰਸਕਤਾਵਾਂ [
6]. ਇਸ ਤਰ੍ਹਾਂ, ਗਠੀਏ ਦੇ ਇਲਾਜ ਲਈ ਘੱਟ ਮਾੜੇ ਪ੍ਰਭਾਵਾਂ ਵਾਲੀ ਇੱਕ ਵਧੇਰੇ ਪ੍ਰਭਾਵਸ਼ਾਲੀ ਦਵਾਈ ਵਿਕਸਤ ਕਰਨ ਦੀ ਲੋੜ ਹੈ।
ਕੁਦਰਤੀ ਸਿਹਤ ਉਤਪਾਦ ਸੁਰੱਖਿਅਤ ਅਤੇ ਆਸਾਨੀ ਨਾਲ ਉਪਲਬਧ ਹੋਣ ਕਰਕੇ ਤੇਜ਼ੀ ਨਾਲ ਪ੍ਰਸਿੱਧ ਹੋ ਰਹੇ ਹਨ [
7]. ਰਵਾਇਤੀ ਕੋਰੀਆਈ ਦਵਾਈਆਂ ਨੇ ਗਠੀਆ ਸਮੇਤ ਕਈ ਸੋਜਸ਼ ਰੋਗਾਂ ਦੇ ਵਿਰੁੱਧ ਪ੍ਰਭਾਵਸ਼ੀਲਤਾ ਸਾਬਤ ਕੀਤੀ ਹੈ [
8]. ਆਕਲੈਂਡੀਆ ਲੱਪਾ ਡੀਸੀ. ਆਪਣੇ ਚਿਕਿਤਸਕ ਗੁਣਾਂ ਲਈ ਜਾਣਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਦਰਦ ਤੋਂ ਰਾਹਤ ਪਾਉਣ ਅਤੇ ਪੇਟ ਨੂੰ ਸ਼ਾਂਤ ਕਰਨ ਲਈ ਕਿਊ ਦੇ ਗੇੜ ਨੂੰ ਵਧਾਉਣਾ, ਅਤੇ ਇਸਨੂੰ ਰਵਾਇਤੀ ਤੌਰ 'ਤੇ ਇੱਕ ਕੁਦਰਤੀ ਦਰਦ ਨਿਵਾਰਕ ਵਜੋਂ ਵਰਤਿਆ ਜਾਂਦਾ ਰਿਹਾ ਹੈ [
9]. ਪਿਛਲੀਆਂ ਰਿਪੋਰਟਾਂ ਸੁਝਾਅ ਦਿੰਦੀਆਂ ਹਨ ਕਿ ਏ. ਲੱਪਾ ਵਿੱਚ ਸਾੜ ਵਿਰੋਧੀ [
10,
11], ਦਰਦ ਨਿਵਾਰਕ [
12], ਕੈਂਸਰ ਵਿਰੋਧੀ [
13], ਅਤੇ ਗੈਸਟ੍ਰੋਪ੍ਰੋਟੈਕਟਿਵ [
14] ਪ੍ਰਭਾਵ। ਏ. ਲੱਪਾ ਦੀਆਂ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਜੈਵਿਕ ਗਤੀਵਿਧੀਆਂ ਇਸਦੇ ਮੁੱਖ ਕਿਰਿਆਸ਼ੀਲ ਮਿਸ਼ਰਣਾਂ ਕਾਰਨ ਹੁੰਦੀਆਂ ਹਨ: ਕੋਸਟੂਨੋਲਾਈਡ, ਡੀਹਾਈਡ੍ਰੋਕੋਸਟਸ ਲੈਕਟੋਨ, ਡਾਈਹਾਈਡ੍ਰੋਕੋਸਟੂਨੋਲਾਈਡ, ਕੋਸਟੂਸਲੈਕਟੋਨ, α-ਕੋਸਟੋਲ, ਸੌਸੂਰੀਆ ਲੈਕਟੋਨ ਅਤੇ ਕੋਸਟੂਸਲੈਕਟੋਨ [
15]. ਪਹਿਲਾਂ ਦੇ ਅਧਿਐਨਾਂ ਦਾ ਦਾਅਵਾ ਹੈ ਕਿ ਕੋਸਟੂਨੋਲਾਈਡ ਨੇ ਲਿਪੋਪੋਲੀਸੈਕਰਾਈਡ (LPS) ਵਿੱਚ ਸਾੜ-ਵਿਰੋਧੀ ਗੁਣ ਦਿਖਾਏ, ਜਿਸਨੇ NF-kB ਅਤੇ ਹੀਟ ਸ਼ੌਕ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਮਾਰਗ ਦੇ ਨਿਯਮਨ ਦੁਆਰਾ ਮੈਕਰੋਫੈਜਾਂ ਨੂੰ ਪ੍ਰੇਰਿਤ ਕੀਤਾ [
16,
17]। ਹਾਲਾਂਕਿ, ਕਿਸੇ ਵੀ ਅਧਿਐਨ ਨੇ OA ਦੇ ਇਲਾਜ ਲਈ A. lappa ਦੀਆਂ ਸੰਭਾਵੀ ਗਤੀਵਿਧੀਆਂ ਦੀ ਜਾਂਚ ਨਹੀਂ ਕੀਤੀ ਹੈ। ਮੌਜੂਦਾ ਖੋਜ ਨੇ (ਮੋਨੋਸੋਡੀਅਮ-ਆਇਓਡੋਐਸੀਟੇਟ) MIA ਅਤੇ ਐਸੀਟਿਕ ਐਸਿਡ-ਪ੍ਰੇਰਿਤ ਚੂਹੇ ਵਾਲੇ ਮਾਡਲਾਂ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੇ ਹੋਏ OA ਦੇ ਵਿਰੁੱਧ A. lappa ਦੇ ਇਲਾਜ ਪ੍ਰਭਾਵਾਂ ਦੀ ਜਾਂਚ ਕੀਤੀ ਹੈ।
ਮੋਨੋਸੋਡੀਅਮ-ਆਇਓਡੋਐਸੀਟੇਟ (MIA) ਜਾਨਵਰਾਂ ਵਿੱਚ ਦਰਦ ਦੇ ਵਿਵਹਾਰਾਂ ਅਤੇ OA ਦੇ ਪੈਥੋਫਿਜ਼ੀਓਲੋਜੀਕਲ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾਵਾਂ ਨੂੰ ਪੈਦਾ ਕਰਨ ਲਈ ਮਸ਼ਹੂਰ ਤੌਰ 'ਤੇ ਵਰਤਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ [
18,
19,
20]. ਜਦੋਂ ਗੋਡਿਆਂ ਦੇ ਜੋੜਾਂ ਵਿੱਚ ਟੀਕਾ ਲਗਾਇਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਤਾਂ MIA ਕੰਡ੍ਰੋਸਾਈਟ ਮੈਟਾਬੋਲਿਜ਼ਮ ਨੂੰ ਵਿਗਾੜਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਸੋਜ ਅਤੇ ਸੋਜਸ਼ ਦੇ ਲੱਛਣਾਂ ਨੂੰ ਪ੍ਰੇਰਿਤ ਕਰਦਾ ਹੈ, ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਕਾਰਟੀਲੇਜ ਅਤੇ ਸਬਕੌਂਡ੍ਰਲ ਹੱਡੀਆਂ ਦਾ ਖੋਰਾ, OA ਦੇ ਮੁੱਖ ਲੱਛਣ [
18]. ਐਸੀਟਿਕ ਐਸਿਡ ਨਾਲ ਪ੍ਰੇਰਿਤ ਲਿਖਣ ਦੀ ਪ੍ਰਤੀਕਿਰਿਆ ਨੂੰ ਵਿਆਪਕ ਤੌਰ 'ਤੇ ਜਾਨਵਰਾਂ ਵਿੱਚ ਪੈਰੀਫਿਰਲ ਦਰਦ ਦੇ ਸਿਮੂਲੇਸ਼ਨ ਵਜੋਂ ਮੰਨਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ ਜਿੱਥੇ ਸੋਜਸ਼ ਦੇ ਦਰਦ ਨੂੰ ਮਾਤਰਾਤਮਕ ਤੌਰ 'ਤੇ ਮਾਪਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ [
19]. ਮਾਊਸ ਮੈਕਰੋਫੇਜ ਸੈੱਲ ਲਾਈਨ, RAW264.7, ਸੋਜਸ਼ ਪ੍ਰਤੀ ਸੈਲੂਲਰ ਪ੍ਰਤੀਕਿਰਿਆਵਾਂ ਦਾ ਅਧਿਐਨ ਕਰਨ ਲਈ ਪ੍ਰਸਿੱਧ ਤੌਰ 'ਤੇ ਵਰਤੀ ਜਾਂਦੀ ਹੈ। LPS ਨਾਲ ਕਿਰਿਆਸ਼ੀਲ ਹੋਣ 'ਤੇ, RAW264 ਮੈਕਰੋਫੈਜ ਸੋਜਸ਼ ਮਾਰਗਾਂ ਨੂੰ ਸਰਗਰਮ ਕਰਦੇ ਹਨ ਅਤੇ ਕਈ ਸੋਜਸ਼ ਵਿਚੋਲਿਆਂ ਨੂੰ ਛੁਪਾਉਂਦੇ ਹਨ, ਜਿਵੇਂ ਕਿ TNF-α, COX-2, IL-1β, iNOS, ਅਤੇ IL-6 [
20]. ਇਸ ਅਧਿਐਨ ਨੇ MIA ਜਾਨਵਰ ਮਾਡਲ, ਐਸੀਟਿਕ ਐਸਿਡ-ਪ੍ਰੇਰਿਤ ਜਾਨਵਰ ਮਾਡਲ, ਅਤੇ LPS-ਸਰਗਰਮ RAW264.7 ਸੈੱਲਾਂ ਵਿੱਚ OA ਦੇ ਵਿਰੁੱਧ A. lappa ਦੇ ਐਂਟੀ-ਨੋਸੀਸੈਪਟਿਵ ਅਤੇ ਐਂਟੀ-ਇਨਫਲੇਮੇਟਰੀ ਪ੍ਰਭਾਵਾਂ ਦਾ ਮੁਲਾਂਕਣ ਕੀਤਾ ਹੈ।
2. ਸਮੱਗਰੀ ਅਤੇ ਢੰਗ
2.1. ਪੌਦਿਆਂ ਦੀ ਸਮੱਗਰੀ
ਪ੍ਰਯੋਗ ਵਿੱਚ ਵਰਤੀ ਗਈ ਏ. ਲੱਪਾ ਡੀਸੀ. ਦੀ ਸੁੱਕੀ ਜੜ੍ਹ ਏਪੁਲਿਪ ਫਾਰਮਾਸਿਊਟੀਕਲ ਕੰਪਨੀ, ਲਿਮਟਿਡ, (ਸਿਓਲ, ਕੋਰੀਆ) ਤੋਂ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ। ਇਸਦੀ ਪਛਾਣ ਪ੍ਰੋ. ਡੋਂਗਹੁਨ ਲੀ, ਹਰਬਲ ਫਾਰਮਾਕੋਲੋਜੀ ਵਿਭਾਗ, ਕੋਰੀਅਨ ਮੈਡੀਸਨ ਦੇ ਕਰਨਲ, ਗਾਚੋਨ ਯੂਨੀਵਰਸਿਟੀ ਦੁਆਰਾ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ, ਅਤੇ ਵਾਊਚਰ ਨਮੂਨਾ ਨੰਬਰ 18060301 ਵਜੋਂ ਜਮ੍ਹਾ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।
2.2. ਏ. ਲੱਪਾ ਐਬਸਟਰੈਕਟ ਦਾ HPLC ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ
ਏ. ਲੱਪਾ ਨੂੰ ਇੱਕ ਰਿਫਲਕਸ ਉਪਕਰਣ (ਡਿਸਟਿਲਡ ਵਾਟਰ, 100 ਡਿਗਰੀ ਸੈਲਸੀਅਸ 'ਤੇ 3 ਘੰਟੇ) ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਕੱਢਿਆ ਗਿਆ ਸੀ। ਕੱਢੇ ਗਏ ਘੋਲ ਨੂੰ ਘੱਟ-ਦਬਾਅ ਵਾਲੇ ਵਾਸ਼ਪੀਕਰਨ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਫਿਲਟਰ ਅਤੇ ਸੰਘਣਾ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ। ਏ. ਲੱਪਾ ਐਬਸਟਰੈਕਟ ਦਾ −80 ਡਿਗਰੀ ਸੈਲਸੀਅਸ ਦੇ ਹੇਠਾਂ ਫ੍ਰੀਜ਼-ਸੁਕਾਉਣ ਤੋਂ ਬਾਅਦ 44.69% ਦਾ ਝਾੜ ਸੀ। ਏ. ਲੱਪਾ ਦਾ ਕ੍ਰੋਮੈਟੋਗ੍ਰਾਫਿਕ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ 1260 ਇਨਫਿਨਿਟੀⅡ ਐਚਪੀਐਲਸੀ-ਸਿਸਟਮ (ਐਜਿਲੈਂਟ, ਪਾਲ ਆਲਟੋ, ਸੀਏ, ਯੂਐਸਏ) ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਜੁੜੇ ਐਚਪੀਐਲਸੀ ਨਾਲ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ। ਕ੍ਰੋਮੈਟਿਕ ਵੱਖ ਕਰਨ ਲਈ, ਈਕਲਿਪਸਐਕਸਡੀਬੀ ਸੀ18 ਕਾਲਮ (4.6 × 250 ਮਿਲੀਮੀਟਰ, 5 µm, ਐਜਿਲੈਂਟ) 35 ਡਿਗਰੀ ਸੈਲਸੀਅਸ 'ਤੇ ਵਰਤਿਆ ਗਿਆ ਸੀ। ਨਮੂਨੇ ਦੇ ਕੁੱਲ 100 ਮਿਲੀਗ੍ਰਾਮ ਨੂੰ 50% ਮੀਥੇਨੌਲ ਦੇ 10 ਮਿ.ਲੀ. ਵਿੱਚ ਪਤਲਾ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ ਅਤੇ 10 ਮਿੰਟ ਲਈ ਸੋਨਿਕੇਟ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ। ਨਮੂਨਿਆਂ ਨੂੰ 0.45 μm ਦੇ ਸਰਿੰਜ ਫਿਲਟਰ (ਵਾਟਰਸ ਕਾਰਪੋਰੇਸ਼ਨ, ਮਿਲਫੋਰਡ, ਐਮਏ, ਯੂਐਸਏ) ਨਾਲ ਫਿਲਟਰ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ। ਮੋਬਾਈਲ ਫੇਜ਼ ਰਚਨਾ 0.1% ਫਾਸਫੋਰਿਕ ਐਸਿਡ (A) ਅਤੇ ਐਸੀਟੋਨਾਈਟ੍ਰਾਈਲ (B) ਸੀ ਅਤੇ ਕਾਲਮ ਨੂੰ ਇਸ ਤਰ੍ਹਾਂ ਐਲੂਟ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ: 0–60 ਮਿੰਟ, 0%; 60–65 ਮਿੰਟ, 100%; 65–67 ਮਿੰਟ, 100%; 67–72 ਮਿੰਟ, 0% ਘੋਲਨ ਵਾਲਾ B ਜਿਸਦੀ ਪ੍ਰਵਾਹ ਦਰ 1.0 mL/ਮਿੰਟ ਹੈ। 10 μL ਦੇ ਟੀਕੇ ਵਾਲੀਅਮ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਪ੍ਰਵਾਹ ਨੂੰ 210 nm 'ਤੇ ਦੇਖਿਆ ਗਿਆ। ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਤਿੰਨ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਤੀਆਂ ਵਿੱਚ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।
2.3. ਜਾਨਵਰਾਂ ਦੀ ਰਿਹਾਇਸ਼ ਅਤੇ ਪ੍ਰਬੰਧਨ
5 ਹਫ਼ਤਿਆਂ ਦੀ ਉਮਰ ਦੇ ਨਰ ਸਪ੍ਰੈਗ-ਡਾਵਲੇ (SD) ਚੂਹੇ ਅਤੇ 6 ਹਫ਼ਤਿਆਂ ਦੀ ਉਮਰ ਦੇ ਨਰ ICR ਚੂਹੇ ਸੈਮਟਾਕੋ ਬਾਇਓ ਕੋਰੀਆ (ਗਯੋਂਗਗੀ-ਡੋ, ਕੋਰੀਆ) ਤੋਂ ਖਰੀਦੇ ਗਏ ਸਨ। ਜਾਨਵਰਾਂ ਨੂੰ ਸਥਿਰ ਤਾਪਮਾਨ (22 ± 2 °C) ਅਤੇ ਨਮੀ (55 ± 10%) ਅਤੇ 12/12 ਘੰਟੇ ਦੇ ਹਲਕੇ/ਹਨੇਰੇ ਚੱਕਰ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੇ ਹੋਏ ਇੱਕ ਕਮਰੇ ਵਿੱਚ ਰੱਖਿਆ ਗਿਆ ਸੀ। ਪ੍ਰਯੋਗ ਸ਼ੁਰੂ ਹੋਣ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ ਜਾਨਵਰਾਂ ਨੂੰ ਇੱਕ ਹਫ਼ਤੇ ਤੋਂ ਵੱਧ ਸਮੇਂ ਲਈ ਸਥਿਤੀ ਤੋਂ ਜਾਣੂ ਕਰਵਾਇਆ ਗਿਆ ਸੀ। ਜਾਨਵਰਾਂ ਨੂੰ ਫੀਡ ਅਤੇ ਪਾਣੀ ਦੀ ਇੱਕ ਐਡ ਲਿਬਿਟਮ ਸਪਲਾਈ ਸੀ। ਗਚੋਨ ਯੂਨੀਵਰਸਿਟੀ (GIACUC-R2019003) ਵਿਖੇ ਜਾਨਵਰਾਂ ਦੀ ਦੇਖਭਾਲ ਅਤੇ ਸੰਭਾਲ ਲਈ ਮੌਜੂਦਾ ਨੈਤਿਕ ਨਿਯਮਾਂ ਦੀ ਸਾਰੀਆਂ ਜਾਨਵਰਾਂ ਦੀਆਂ ਪ੍ਰਯੋਗਾਤਮਕ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆਵਾਂ ਵਿੱਚ ਸਖਤੀ ਨਾਲ ਪਾਲਣਾ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ। ਅਧਿਐਨ ਨੂੰ ਜਾਂਚਕਰਤਾ-ਅੰਨ੍ਹੇ ਅਤੇ ਸਮਾਨਾਂਤਰ ਅਜ਼ਮਾਇਸ਼ ਲਈ ਡਿਜ਼ਾਈਨ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ। ਅਸੀਂ ਜਾਨਵਰਾਂ ਦੇ ਪ੍ਰਯੋਗਾਤਮਕ ਨੈਤਿਕਤਾ ਕਮੇਟੀ ਦੇ ਦਿਸ਼ਾ-ਨਿਰਦੇਸ਼ਾਂ ਅਨੁਸਾਰ ਇੱਛਾ ਮੌਤ ਵਿਧੀ ਦੀ ਪਾਲਣਾ ਕੀਤੀ।
2.4. MIA ਟੀਕਾ ਅਤੇ ਇਲਾਜ
ਚੂਹਿਆਂ ਨੂੰ ਬੇਤਰਤੀਬੇ ਨਾਲ 4 ਸਮੂਹਾਂ ਵਿੱਚ ਵੰਡਿਆ ਗਿਆ ਸੀ, ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਸ਼ੈਮ, ਕੰਟਰੋਲ, ਇੰਡੋਮੇਥਾਸਿਨ, ਅਤੇ ਏ. ਲੱਪਾ। 2% ਆਈਸੋਫਲੋਰੇਨ O2 ਮਿਸ਼ਰਣ ਨਾਲ ਬੇਹੋਸ਼ ਕੀਤੇ ਜਾਣ ਤੋਂ ਬਾਅਦ, ਚੂਹਿਆਂ ਨੂੰ ਪ੍ਰਯੋਗਾਤਮਕ OA ਵੱਲ ਲੈ ਜਾਣ ਲਈ ਗੋਡਿਆਂ ਦੇ ਜੋੜਾਂ ਵਿੱਚ 50 μL MIA (40 mg/m; ਸਿਗਮਾ-ਐਲਡਰਿਚ, ਸੇਂਟ ਲੂਈਸ, MO, USA) ਦੇ ਅੰਦਰੂਨੀ ਤੌਰ 'ਤੇ ਟੀਕਾ ਲਗਾਇਆ ਗਿਆ। ਇਲਾਜ ਹੇਠਾਂ ਦਿੱਤੇ ਅਨੁਸਾਰ ਕੀਤੇ ਗਏ ਸਨ: ਨਿਯੰਤਰਣ ਅਤੇ ਸ਼ੈਮ ਸਮੂਹਾਂ ਨੂੰ ਸਿਰਫ਼ AIN-93G ਮੁੱਢਲੀ ਖੁਰਾਕ ਨਾਲ ਬਣਾਈ ਰੱਖਿਆ ਗਿਆ ਸੀ। ਸਿਰਫ਼, ਇੰਡੋਮੇਥਾਸਿਨ ਸਮੂਹ ਨੂੰ AIN-93G ਖੁਰਾਕ ਵਿੱਚ ਸ਼ਾਮਲ ਇੰਡੋਮੇਥਾਸਿਨ (3 mg/kg) ਪ੍ਰਦਾਨ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ ਅਤੇ A. ਲੱਪਾ 300 mg/kg ਸਮੂਹ ਨੂੰ A. ਲੱਪਾ (300 mg/kg) ਨਾਲ ਪੂਰਕ AIN-93G ਖੁਰਾਕ ਲਈ ਨਿਰਧਾਰਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ। OA ਇੰਡਕਸ਼ਨ ਦੇ ਦਿਨ ਤੋਂ ਲੈ ਕੇ ਰੋਜ਼ਾਨਾ ਆਧਾਰ 'ਤੇ 190-210 ਗ੍ਰਾਮ ਸਰੀਰ ਦੇ ਭਾਰ ਪ੍ਰਤੀ 15-17 ਗ੍ਰਾਮ ਦੀ ਦਰ ਨਾਲ ਇਲਾਜ 24 ਦਿਨਾਂ ਲਈ ਜਾਰੀ ਰੱਖਿਆ ਗਿਆ ਸੀ।
2.5. ਭਾਰ ਚੁੱਕਣ ਦਾ ਮਾਪ
OA ਇੰਡਕਸ਼ਨ ਤੋਂ ਬਾਅਦ, ਚੂਹਿਆਂ ਦੇ ਪਿਛਲੇ ਅੰਗਾਂ ਦੀ ਭਾਰ ਚੁੱਕਣ ਦੀ ਸਮਰੱਥਾ ਮਾਪ ਅਨੁਸੂਚਿਤ ਸਮੇਂ ਅਨੁਸਾਰ ਇਨਕੈਪੇਸਿਟੈਂਸ-ਮੀਟਰਟੈਸਟਰ600 (IITC ਲਾਈਫ ਸਾਇੰਸ, ਵੁੱਡਲੈਂਡ ਹਿਲਜ਼, CA, USA) ਨਾਲ ਕੀਤੀ ਗਈ। ਪਿਛਲੇ ਅੰਗਾਂ 'ਤੇ ਭਾਰ ਵੰਡ ਦੀ ਗਣਨਾ ਕੀਤੀ ਗਈ: ਭਾਰ ਚੁੱਕਣ ਦੀ ਸਮਰੱਥਾ (%)
