ਓਸਟੀਓਆਰਥਾਈਟਿਸ (OA) ਲੰਬੇ ਸਮੇਂ ਦੀ ਪੁਰਾਣੀ ਡੀਜਨਰੇਟਿਵ ਹੱਡੀਆਂ ਦੇ ਜੋੜਾਂ ਦੀਆਂ ਬਿਮਾਰੀਆਂ ਵਿੱਚੋਂ ਇੱਕ ਹੈ ਜੋ 65 ਸਾਲ ਤੋਂ ਵੱਧ ਉਮਰ ਦੀ ਆਬਾਦੀ ਨੂੰ ਪ੍ਰਭਾਵਿਤ ਕਰਦੀ ਹੈ।
1]। ਆਮ ਤੌਰ 'ਤੇ, OA ਦੇ ਮਰੀਜ਼ਾਂ ਨੂੰ ਖਰਾਬ ਉਪਾਸਥੀ, ਸੋਜਸ਼ ਵਾਲੇ ਸਿਨੋਵਿਅਮ, ਅਤੇ ਈਰੋਡਡ ਕਾਂਡਰੋਸਾਈਟਸ ਦਾ ਪਤਾ ਲਗਾਇਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਜੋ ਦਰਦ ਅਤੇ ਸਰੀਰਕ ਪਰੇਸ਼ਾਨੀ ਨੂੰ ਚਾਲੂ ਕਰਦੇ ਹਨ [
2]। ਗਠੀਏ ਦਾ ਦਰਦ ਮੁੱਖ ਤੌਰ 'ਤੇ ਸੋਜ ਦੁਆਰਾ ਜੋੜਾਂ ਵਿੱਚ ਉਪਾਸਥੀ ਦੇ ਵਿਗੜਨ ਕਾਰਨ ਹੁੰਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ ਜਦੋਂ ਉਪਾਸਥੀ ਨੂੰ ਗੰਭੀਰ ਰੂਪ ਵਿੱਚ ਨੁਕਸਾਨ ਪਹੁੰਚਦਾ ਹੈ ਤਾਂ ਹੱਡੀਆਂ ਇੱਕ ਦੂਜੇ ਨਾਲ ਟਕਰਾ ਸਕਦੀਆਂ ਹਨ ਜਿਸ ਨਾਲ ਅਸਹਿ ਦਰਦ ਅਤੇ ਸਰੀਰਕ ਕਠਿਨਾਈ ਹੁੰਦੀ ਹੈ।
3]। ਦਰਦ, ਸੋਜ, ਅਤੇ ਜੋੜਾਂ ਦੀ ਕਠੋਰਤਾ ਵਰਗੇ ਲੱਛਣਾਂ ਵਾਲੇ ਸੋਜਸ਼ ਵਿਚੋਲੇ ਦੀ ਸ਼ਮੂਲੀਅਤ ਚੰਗੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਦਸਤਾਵੇਜ਼ੀ ਤੌਰ 'ਤੇ ਦਰਜ ਹੈ। OA ਦੇ ਮਰੀਜ਼ਾਂ ਵਿੱਚ, ਸੋਜ਼ਸ਼ ਵਾਲੇ ਸਾਇਟੋਕਿਨਸ, ਜੋ ਉਪਾਸਥੀ ਅਤੇ ਸਬਚੌਂਡਰਲ ਹੱਡੀਆਂ ਦੇ ਖਾਤਮੇ ਦਾ ਕਾਰਨ ਬਣਦੇ ਹਨ, ਸਿਨੋਵੀਅਲ ਤਰਲ ਵਿੱਚ ਪਾਏ ਜਾਂਦੇ ਹਨ।
4]। ਦੋ ਪ੍ਰਮੁੱਖ ਸ਼ਿਕਾਇਤਾਂ ਜੋ OA ਮਰੀਜ਼ਾਂ ਨੂੰ ਆਮ ਤੌਰ 'ਤੇ ਹੁੰਦੀਆਂ ਹਨ ਉਹ ਹਨ ਦਰਦ ਅਤੇ ਸਿਨੋਵੀਅਲ ਸੋਜਸ਼। ਇਸ ਲਈ ਮੌਜੂਦਾ OA ਥੈਰੇਪੀਆਂ ਦੇ ਪ੍ਰਾਇਮਰੀ ਟੀਚੇ ਦਰਦ ਅਤੇ ਸੋਜ ਨੂੰ ਘੱਟ ਕਰਨਾ ਹਨ। [
5]। ਹਾਲਾਂਕਿ ਗੈਰ-ਸਟੀਰੌਇਡਲ ਅਤੇ ਸਟੀਰੌਇਡਲ ਦਵਾਈਆਂ ਸਮੇਤ ਉਪਲਬਧ OA ਇਲਾਜਾਂ ਨੇ ਦਰਦ ਅਤੇ ਸੋਜਸ਼ ਨੂੰ ਘਟਾਉਣ ਵਿੱਚ ਪ੍ਰਭਾਵਸ਼ੀਲਤਾ ਸਾਬਤ ਕੀਤੀ ਹੈ, ਇਹਨਾਂ ਦਵਾਈਆਂ ਦੀ ਲੰਬੇ ਸਮੇਂ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਦੇ ਗੰਭੀਰ ਸਿਹਤ ਨਤੀਜੇ ਹਨ ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਕਾਰਡੀਓਵੈਸਕੁਲਰ, ਗੈਸਟਰੋ-ਇੰਟੇਸਟਾਈਨਲ, ਅਤੇ ਗੁਰਦੇ ਦੇ ਨਪੁੰਸਕਤਾ [
6]। ਇਸ ਤਰ੍ਹਾਂ, ਓਸਟੀਓਆਰਥਾਈਟਿਸ ਦੇ ਇਲਾਜ ਲਈ ਘੱਟ ਮਾੜੇ ਪ੍ਰਭਾਵਾਂ ਵਾਲੀ ਵਧੇਰੇ ਪ੍ਰਭਾਵੀ ਦਵਾਈ ਵਿਕਸਤ ਕੀਤੀ ਜਾਣੀ ਚਾਹੀਦੀ ਹੈ।
ਕੁਦਰਤੀ ਸਿਹਤ ਉਤਪਾਦ ਸੁਰੱਖਿਅਤ ਅਤੇ ਅਸਾਨੀ ਨਾਲ ਉਪਲਬਧ ਹੋਣ ਲਈ ਤੇਜ਼ੀ ਨਾਲ ਪ੍ਰਸਿੱਧ ਹੋ ਰਹੇ ਹਨ।
7]। ਪਰੰਪਰਾਗਤ ਕੋਰੀਆਈ ਦਵਾਈਆਂ ਨੇ ਗਠੀਏ ਸਮੇਤ ਕਈ ਸੋਜਸ਼ ਰੋਗਾਂ ਦੇ ਵਿਰੁੱਧ ਪ੍ਰਭਾਵ ਨੂੰ ਸਾਬਤ ਕੀਤਾ ਹੈ [
8]। ਆਕਲੈਂਡੀਆ ਲੱਪਾ ਡੀ.ਸੀ. ਇਸ ਦੇ ਚਿਕਿਤਸਕ ਗੁਣਾਂ ਲਈ ਜਾਣਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਦਰਦ ਤੋਂ ਰਾਹਤ ਅਤੇ ਪੇਟ ਨੂੰ ਸ਼ਾਂਤ ਕਰਨ ਲਈ ਕਿਊਈ ਦੇ ਸੰਚਾਰ ਨੂੰ ਵਧਾਉਣਾ, ਅਤੇ ਰਵਾਇਤੀ ਤੌਰ 'ਤੇ ਇੱਕ ਕੁਦਰਤੀ ਐਨਾਲਜਿਕ ਵਜੋਂ ਵਰਤਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।
9]। ਪਿਛਲੀਆਂ ਰਿਪੋਰਟਾਂ ਸੁਝਾਅ ਦਿੰਦੀਆਂ ਹਨ ਕਿ ਏ. ਲੱਪਾ ਵਿੱਚ ਸਾੜ ਵਿਰੋਧੀ ਹੈ।
10,
11], ਦਰਦਨਾਸ਼ਕ [
12], ਕੈਂਸਰ ਵਿਰੋਧੀ [
13], ਅਤੇ ਗੈਸਟ੍ਰੋਪ੍ਰੋਟੈਕਟਿਵ [
14] ਪ੍ਰਭਾਵ। ਏ. ਲੈਪਾ ਦੀਆਂ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਜੀਵ-ਵਿਗਿਆਨਕ ਕਿਰਿਆਵਾਂ ਇਸਦੇ ਮੁੱਖ ਕਿਰਿਆਸ਼ੀਲ ਮਿਸ਼ਰਣਾਂ ਕਾਰਨ ਹੁੰਦੀਆਂ ਹਨ: ਕਾਸਟੁਨੋਲਾਈਡ, ਡੀਹਾਈਡ੍ਰੋਕੋਸਟਸ ਲੈਕਟੋਨ, ਡਾਈਹਾਈਡ੍ਰੋਕੋਸਟੂਨੋਲਾਇਡ, ਕੌਸਟਸਲੈਕਟੋਨ, α-ਕੋਸਟੋਲ, ਸੌਸੁਰੀਆ ਲੈਕਟੋਨ ਅਤੇ ਕੌਸਟੁਸਲੈਕਟੋਨ [
15]। ਪਹਿਲਾਂ ਦੇ ਅਧਿਐਨਾਂ ਵਿੱਚ ਦਾਅਵਾ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਹੈ ਕਿ ਕੋਸਟੂਨੋਲਾਈਡ ਨੇ ਲਿਪੋਪੋਲੀਸੈਕਰਾਈਡ (ਐਲਪੀਐਸ) ਵਿੱਚ ਸਾੜ-ਵਿਰੋਧੀ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾਵਾਂ ਦਿਖਾਈਆਂ, ਜਿਸ ਨੇ ਐਨਐਫ-ਕੇਬੀ ਅਤੇ ਗਰਮੀ ਦੇ ਝਟਕੇ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਮਾਰਗ ਦੇ ਨਿਯਮ ਦੁਆਰਾ ਮੈਕਰੋਫੈਜ ਨੂੰ ਪ੍ਰੇਰਿਤ ਕੀਤਾ।
16,
17]। ਹਾਲਾਂਕਿ, ਕਿਸੇ ਵੀ ਅਧਿਐਨ ਨੇ OA ਇਲਾਜ ਲਈ A. lappa ਦੀਆਂ ਸੰਭਾਵੀ ਗਤੀਵਿਧੀਆਂ ਦੀ ਜਾਂਚ ਨਹੀਂ ਕੀਤੀ ਹੈ। ਮੌਜੂਦਾ ਖੋਜ ਨੇ (ਮੋਨੋਸੋਡੀਅਮ-ਆਇਓਡੋਏਸੇਟੇਟ) MIA ਅਤੇ ਐਸੀਟਿਕ ਐਸਿਡ-ਪ੍ਰੇਰਿਤ ਚੂਹੇ ਮਾਡਲਾਂ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੇ ਹੋਏ OA ਦੇ ਵਿਰੁੱਧ A. lappa ਦੇ ਉਪਚਾਰਕ ਪ੍ਰਭਾਵਾਂ ਦੀ ਜਾਂਚ ਕੀਤੀ ਹੈ।
ਮੋਨੋਸੋਡੀਅਮ-ਆਇਓਡੋਐਸੇਟੇਟ (ਐਮਆਈਏ) ਮਸ਼ਹੂਰ ਤੌਰ 'ਤੇ ਜਾਨਵਰਾਂ ਵਿੱਚ ਦਰਦ ਦੇ ਬਹੁਤ ਸਾਰੇ ਵਿਵਹਾਰ ਅਤੇ OA ਦੀਆਂ ਪਾਥੋਫਿਜ਼ੀਓਲੋਜੀਕਲ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾਵਾਂ ਪੈਦਾ ਕਰਨ ਲਈ ਵਰਤਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।
18,
19,
20]। ਜਦੋਂ ਗੋਡਿਆਂ ਦੇ ਜੋੜਾਂ ਵਿੱਚ ਟੀਕਾ ਲਗਾਇਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, MIA chondrocyte metabolism ਨੂੰ ਵਿਗਾੜਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਸੋਜ਼ਸ਼ ਅਤੇ ਸੋਜਸ਼ ਦੇ ਲੱਛਣਾਂ ਨੂੰ ਪ੍ਰੇਰਿਤ ਕਰਦਾ ਹੈ, ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਉਪਾਸਥੀ ਅਤੇ ਸਬਚੌਂਡਰਲ ਹੱਡੀਆਂ ਦੇ ਫਟਣ, OA ਦੇ ਮੁੱਖ ਲੱਛਣ [
18]। ਐਸੀਟਿਕ ਐਸਿਡ ਨਾਲ ਪ੍ਰੇਰਿਤ ਰਾਈਥਿੰਗ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਨੂੰ ਵਿਆਪਕ ਤੌਰ 'ਤੇ ਜਾਨਵਰਾਂ ਵਿੱਚ ਪੈਰੀਫਿਰਲ ਦਰਦ ਦੇ ਸਿਮੂਲੇਸ਼ਨ ਵਜੋਂ ਮੰਨਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ ਜਿੱਥੇ ਸੋਜਸ਼ ਦੇ ਦਰਦ ਨੂੰ ਮਾਤਰਾਤਮਕ ਤੌਰ 'ਤੇ ਮਾਪਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।
19]। ਮਾਊਸ ਮੈਕਰੋਫੇਜ ਸੈੱਲ ਲਾਈਨ, RAW264.7, ਸੋਜਸ਼ ਪ੍ਰਤੀ ਸੈਲੂਲਰ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆਵਾਂ ਦਾ ਅਧਿਐਨ ਕਰਨ ਲਈ ਪ੍ਰਸਿੱਧ ਤੌਰ 'ਤੇ ਵਰਤੀ ਜਾਂਦੀ ਹੈ। ਐਲਪੀਐਸ ਦੇ ਨਾਲ ਸਰਗਰਮ ਹੋਣ 'ਤੇ, RAW264 ਮੈਕਰੋਫੈਜ ਸੋਜ਼ਸ਼ ਦੇ ਰਸਤੇ ਨੂੰ ਸਰਗਰਮ ਕਰਦੇ ਹਨ ਅਤੇ ਕਈ ਸੋਜਸ਼ ਵਾਲੇ ਵਿਚੋਲੇ ਬਣਾਉਂਦੇ ਹਨ, ਜਿਵੇਂ ਕਿ TNF-α, COX-2, IL-1β, iNOS, ਅਤੇ IL-6 [
20]। ਇਸ ਅਧਿਐਨ ਨੇ MIA ਜਾਨਵਰ ਮਾਡਲ, ਐਸੀਟਿਕ ਐਸਿਡ-ਪ੍ਰੇਰਿਤ ਜਾਨਵਰ ਮਾਡਲ, ਅਤੇ LPS-ਐਕਟੀਵੇਟਿਡ RAW264.7 ਸੈੱਲਾਂ ਵਿੱਚ OA ਦੇ ਵਿਰੁੱਧ A. lappa ਦੇ ਐਂਟੀ-ਨੋਸੀਸੈਪਟਿਵ ਅਤੇ ਸਾੜ ਵਿਰੋਧੀ ਪ੍ਰਭਾਵਾਂ ਦਾ ਮੁਲਾਂਕਣ ਕੀਤਾ ਹੈ।
2. ਸਮੱਗਰੀ ਅਤੇ ਢੰਗ
2.1 ਪੌਦਾ ਸਮੱਗਰੀ
A. lappa DC ਦੀ ਸੁੱਕੀ ਜੜ੍ਹ. ਪ੍ਰਯੋਗ ਵਿੱਚ ਵਰਤਿਆ ਗਿਆ ਏਪੁਲਿਪ ਫਾਰਮਾਸਿਊਟੀਕਲ ਕੰਪਨੀ, ਲਿਮਟਿਡ, (ਸਿਓਲ, ਕੋਰੀਆ) ਤੋਂ ਖਰੀਦਿਆ ਗਿਆ ਸੀ। ਇਸ ਦੀ ਪਛਾਣ ਪ੍ਰੋ. ਡੌਂਘੂਨ ਲੀ, ਹਰਬਲ ਫਾਰਮਾਕੋਲੋਜੀ ਵਿਭਾਗ, ਕੋਰੀਅਨ ਮੈਡੀਸਨ ਦੇ ਕਰਨਲ, ਗਾਚੋਨ ਯੂਨੀਵਰਸਿਟੀ ਦੁਆਰਾ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ, ਅਤੇ ਵਾਊਚਰ ਦਾ ਨਮੂਨਾ ਨੰਬਰ 18060301 ਵਜੋਂ ਜਮ੍ਹਾਂ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।
2.2 A. lappa ਐਬਸਟਰੈਕਟ ਦਾ HPLC ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ
ਏ. ਲੱਪਾ ਨੂੰ ਇੱਕ ਰਿਫਲਕਸ ਯੰਤਰ (ਡਿਸਟਿਲਡ ਵਾਟਰ, 100 ਡਿਗਰੀ ਸੈਲਸੀਅਸ 'ਤੇ 3 ਘੰਟੇ) ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਕੱਢਿਆ ਗਿਆ ਸੀ। ਕੱਢੇ ਗਏ ਘੋਲ ਨੂੰ ਘੱਟ ਦਬਾਅ ਵਾਲੇ ਭਾਫ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਫਿਲਟਰ ਅਤੇ ਸੰਘਣਾ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ। ਏ. ਲੱਪਾ ਐਬਸਟਰੈਕਟ ਦਾ −80 ਡਿਗਰੀ ਸੈਲਸੀਅਸ ਦੇ ਹੇਠਾਂ ਫਰੀਜ਼-ਸੁਕਾਉਣ ਤੋਂ ਬਾਅਦ 44.69% ਦਾ ਝਾੜ ਸੀ। A. lappa ਦਾ ਕ੍ਰੋਮੈਟੋਗ੍ਰਾਫਿਕ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ 1260 InfinityⅡ HPLC-ਸਿਸਟਮ (Agilent, Pal Alto, CA, USA) ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੇ ਹੋਏ ਇੱਕ HPLC ਨਾਲ ਜੁੜਿਆ ਹੋਇਆ ਸੀ। ਕ੍ਰੋਮੈਟਿਕ ਵਿਭਾਜਨ ਲਈ, EclipseXDB C18 ਕਾਲਮ (4.6 × 250 mm, 5 µm, Agilent) 35 °C 'ਤੇ ਵਰਤਿਆ ਗਿਆ ਸੀ। ਕੁੱਲ 100 ਮਿਲੀਗ੍ਰਾਮ ਨਮੂਨੇ ਨੂੰ 50% ਮੀਥੇਨੌਲ ਦੇ 10 ਮਿ.ਲੀ. ਵਿੱਚ ਪੇਤਲੀ ਪੈ ਗਿਆ ਅਤੇ 10 ਮਿੰਟ ਲਈ ਸੋਨਿਕ ਕੀਤਾ ਗਿਆ। ਨਮੂਨਿਆਂ ਨੂੰ 0.45 μm ਦੇ ਇੱਕ ਸਰਿੰਜ ਫਿਲਟਰ (ਵਾਟਰਸ ਕਾਰਪੋਰੇਸ਼ਨ, ਮਿਲਫੋਰਡ, ਐਮ.ਏ., ਯੂ.ਐਸ.ਏ.) ਨਾਲ ਫਿਲਟਰ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ। ਮੋਬਾਈਲ ਪੜਾਅ ਦੀ ਰਚਨਾ 0.1% ਫਾਸਫੋਰਿਕ ਐਸਿਡ (ਏ) ਅਤੇ ਐਸੀਟੋਨਾਈਟ੍ਰਾਈਲ (ਬੀ) ਸੀ ਅਤੇ ਕਾਲਮ ਨੂੰ ਇਸ ਤਰ੍ਹਾਂ ਦਰਸਾਇਆ ਗਿਆ ਸੀ: 0-60 ਮਿੰਟ, 0%; 60–65 ਮਿੰਟ, 100%; 65–67 ਮਿੰਟ, 100%; 67–72 ਮਿੰਟ, 0% ਘੋਲਨ ਵਾਲਾ B 1.0 mL/min ਦੀ ਵਹਾਅ ਦਰ ਨਾਲ। 10 μL ਦੇ ਇੰਜੈਕਸ਼ਨ ਵਾਲੀਅਮ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੇ ਹੋਏ 210 nm 'ਤੇ ਪ੍ਰਵਾਹ ਦੇਖਿਆ ਗਿਆ ਸੀ। ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਤਿੰਨ ਗੁਣਾਂ ਵਿੱਚ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।
2.3 ਐਨੀਮਲ ਹਾਊਸਿੰਗ ਅਤੇ ਪ੍ਰਬੰਧਨ
5 ਹਫਤਿਆਂ ਦੀ ਉਮਰ ਦੇ ਨਰ ਸਪ੍ਰੈਗ-ਡੌਲੀ (SD) ਚੂਹੇ ਅਤੇ 6 ਹਫਤਿਆਂ ਦੀ ਉਮਰ ਦੇ ਨਰ ਆਈਸੀਆਰ ਚੂਹੇ ਸਮਤਾਕੋ ਬਾਇਓ ਕੋਰੀਆ (ਗਯੋਂਗਗੀ-ਡੋ, ਕੋਰੀਆ) ਤੋਂ ਖਰੀਦੇ ਗਏ ਸਨ। ਜਾਨਵਰਾਂ ਨੂੰ ਇੱਕ ਕਮਰੇ ਵਿੱਚ ਸਥਿਰ ਤਾਪਮਾਨ (22 ± 2 ° C) ਅਤੇ ਨਮੀ (55 ± 10%) ਅਤੇ 12/12 ਘੰਟੇ ਦੇ ਹਲਕੇ/ਹਨੇਰੇ ਚੱਕਰ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਰੱਖਿਆ ਗਿਆ ਸੀ। ਪ੍ਰਯੋਗ ਸ਼ੁਰੂ ਹੋਣ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ ਜਾਨਵਰਾਂ ਨੂੰ ਇੱਕ ਹਫ਼ਤੇ ਤੋਂ ਵੱਧ ਸਮੇਂ ਲਈ ਸਥਿਤੀ ਤੋਂ ਜਾਣੂ ਕਰਵਾਇਆ ਗਿਆ ਸੀ। ਜਾਨਵਰਾਂ ਨੂੰ ਫੀਡ ਅਤੇ ਪਾਣੀ ਦੀ ਇੱਕ ਅਡਲੀਟਮ ਸਪਲਾਈ ਸੀ। ਗੈਚੋਨ ਯੂਨੀਵਰਸਿਟੀ (GIACUC-R2019003) ਵਿਖੇ ਜਾਨਵਰਾਂ ਦੀ ਦੇਖਭਾਲ ਅਤੇ ਪ੍ਰਬੰਧਨ ਲਈ ਮੌਜੂਦਾ ਨੈਤਿਕ ਨਿਯਮਾਂ ਦੀ ਪਾਲਣਾ ਸਾਰੇ ਜਾਨਵਰਾਂ ਦੀ ਪ੍ਰਯੋਗਾਤਮਕ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆਵਾਂ ਵਿੱਚ ਸਖਤੀ ਨਾਲ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ। ਅਧਿਐਨ ਨੂੰ ਜਾਂਚਕਰਤਾ-ਅੰਨ੍ਹੇ ਅਤੇ ਸਮਾਨਾਂਤਰ ਟ੍ਰਾਇਲ ਤਿਆਰ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ। ਅਸੀਂ ਪਸ਼ੂ ਪ੍ਰਯੋਗਾਤਮਕ ਨੈਤਿਕਤਾ ਕਮੇਟੀ ਦੇ ਦਿਸ਼ਾ-ਨਿਰਦੇਸ਼ਾਂ ਦੇ ਅਨੁਸਾਰ ਇੱਛਾ ਮੌਤ ਵਿਧੀ ਦਾ ਪਾਲਣ ਕੀਤਾ।
2.4 MIA ਇੰਜੈਕਸ਼ਨ ਅਤੇ ਇਲਾਜ
ਚੂਹਿਆਂ ਨੂੰ ਬੇਤਰਤੀਬੇ 4 ਸਮੂਹਾਂ ਵਿੱਚ ਵੰਡਿਆ ਗਿਆ ਸੀ, ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਸ਼ੈਮ, ਕੰਟਰੋਲ, ਇੰਡੋਮੇਥਾਸਿਨ ਅਤੇ ਏ. ਲੈਪਾ। 2% ਆਈਸੋਫਲੋਰੇਨ O2 ਮਿਸ਼ਰਣ ਨਾਲ ਬੇਹੋਸ਼ ਹੋਣ ਦੇ ਕਾਰਨ, ਚੂਹਿਆਂ ਨੂੰ 50 μL MIA (40 mg/m; Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਪ੍ਰਯੋਗਾਤਮਕ OA ਕਰਨ ਲਈ ਗੋਡਿਆਂ ਦੇ ਜੋੜਾਂ ਵਿੱਚ ਅੰਦਰੂਨੀ ਤੌਰ 'ਤੇ ਟੀਕਾ ਲਗਾਇਆ ਗਿਆ ਸੀ। ਇਲਾਜ ਹੇਠਾਂ ਦਿੱਤੇ ਅਨੁਸਾਰ ਕੀਤੇ ਗਏ ਸਨ: ਨਿਯੰਤਰਣ ਅਤੇ ਸ਼ੈਮ ਸਮੂਹਾਂ ਨੂੰ ਕੇਵਲ AIN-93G ਮੂਲ ਖੁਰਾਕ ਨਾਲ ਹੀ ਬਣਾਈ ਰੱਖਿਆ ਗਿਆ ਸੀ। ਸਿਰਫ਼, ਇੰਡੋਮੇਥਾਸਿਨ ਗਰੁੱਪ ਨੂੰ ਏਆਈਐਨ-93ਜੀ ਖੁਰਾਕ ਵਿੱਚ ਸ਼ਾਮਲ ਇੰਡੋਮੇਥਾਸੀਨ (3 ਮਿਲੀਗ੍ਰਾਮ/ਕਿਲੋਗ੍ਰਾਮ) ਪ੍ਰਦਾਨ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ ਅਤੇ ਏ. ਲੈਪਾ 300 ਮਿਲੀਗ੍ਰਾਮ/ਕਿਲੋਗ੍ਰਾਮ ਗਰੁੱਪ ਨੂੰ ਏ.ਲੱਪਾ (300 ਮਿਲੀਗ੍ਰਾਮ/ਕਿਲੋਗ੍ਰਾਮ) ਨਾਲ ਪੂਰਕ ਕੀਤੀ ਗਈ ਏਆਈਐਨ-93ਜੀ ਖੁਰਾਕ ਲਈ ਨਿਰਧਾਰਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ। ਰੋਜ਼ਾਨਾ ਆਧਾਰ 'ਤੇ 15-17 ਗ੍ਰਾਮ ਪ੍ਰਤੀ 190-210 ਗ੍ਰਾਮ ਸਰੀਰ ਦੇ ਭਾਰ ਦੀ ਦਰ ਨਾਲ OA ਸ਼ਾਮਲ ਕਰਨ ਦੇ ਦਿਨ ਤੋਂ 24 ਦਿਨਾਂ ਤੱਕ ਇਲਾਜ ਜਾਰੀ ਰੱਖਿਆ ਗਿਆ ਸੀ।
2.5 ਭਾਰ ਚੁੱਕਣ ਦਾ ਮਾਪ
ਓਏ ਇੰਡਕਸ਼ਨ ਤੋਂ ਬਾਅਦ, ਚੂਹਿਆਂ ਦੇ ਪਿਛਲੇ ਅੰਗਾਂ ਦਾ ਭਾਰ ਚੁੱਕਣ ਦੀ ਸਮਰੱਥਾ ਦਾ ਮਾਪ ਅਸਮਰੱਥਾ-ਮੀਟਰ ਟੈਸਟਰ 600 (IITC ਲਾਈਫ ਸਾਇੰਸ, ਵੁੱਡਲੈਂਡ ਹਿਲਸ, CA, USA) ਦੇ ਨਾਲ ਅਨੁਸੂਚਿਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ। ਪਿਛਲੇ ਅੰਗਾਂ 'ਤੇ ਭਾਰ ਦੀ ਵੰਡ ਦੀ ਗਣਨਾ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ: ਭਾਰ ਚੁੱਕਣ ਦੀ ਸਮਰੱਥਾ (%)
