ਮੋਮਬੱਤੀ ਅਤੇ ਸਾਬਣ ਬਣਾਉਣ ਲਈ ਸ਼ੁੱਧ ਸਾਪੋਸ਼ਨੀਕੋਵੀਆ ਡਿਵੈਰੀਕਾਟਾ ਤੇਲ ਰੀਡ ਬਰਨਰ ਡਿਫਿਊਜ਼ਰ ਲਈ ਨਵਾਂ ਥੋਕ ਵਿਸਾਰਣ ਵਾਲਾ ਜ਼ਰੂਰੀ ਤੇਲ

ਛੋਟਾ ਵੇਰਵਾ:

 

2.1 SDE ਦੀ ਤਿਆਰੀ

SD ਦੇ ਰਾਈਜ਼ੋਮ ਨੂੰ ਹੈਨਹਰਬ ਕੰਪਨੀ (ਗੁਰੀ, ਕੋਰੀਆ) ਤੋਂ ਸੁੱਕੀਆਂ ਜੜੀ ਬੂਟੀਆਂ ਵਜੋਂ ਖਰੀਦਿਆ ਗਿਆ ਸੀ। ਕੋਰੀਆ ਇੰਸਟੀਚਿਊਟ ਆਫ਼ ਓਰੀਐਂਟਲ ਮੈਡੀਸਨ (KIOM) ਦੇ ਡਾ. ਗੋ-ਯਾ ਚੋਈ ਦੁਆਰਾ ਪੌਦਿਆਂ ਦੀ ਸਮੱਗਰੀ ਦੀ ਪੁਸ਼ਟੀ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ। ਇੱਕ ਵਾਊਚਰ ਦਾ ਨਮੂਨਾ (ਨੰਬਰ 2014 SDE-6) ਸਟੈਂਡਰਡ ਹਰਬਲ ਸਰੋਤਾਂ ਦੇ ਕੋਰੀਅਨ ਹਰਬੇਰੀਅਮ ਵਿੱਚ ਜਮ੍ਹਾਂ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ। SD (320 g) ਦੇ ਸੁੱਕੇ rhizomes ਨੂੰ 70% ਈਥਾਨੌਲ (2 ਘੰਟੇ ਦੇ ਰਿਫਲਕਸ ਦੇ ਨਾਲ) ਨਾਲ ਦੋ ਵਾਰ ਕੱਢਿਆ ਗਿਆ ਸੀ ਅਤੇ ਫਿਰ ਐਬਸਟਰੈਕਟ ਨੂੰ ਘੱਟ ਦਬਾਅ ਹੇਠ ਕੇਂਦਰਿਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ। ਡੀਕੋਕਸ਼ਨ ਨੂੰ ਫਿਲਟਰ ਕੀਤਾ ਗਿਆ, ਲਾਇਓਫਿਲਾਈਜ਼ ਕੀਤਾ ਗਿਆ, ਅਤੇ 4 ਡਿਗਰੀ ਸੈਲਸੀਅਸ 'ਤੇ ਸਟੋਰ ਕੀਤਾ ਗਿਆ। ਕੱਚੀ ਸ਼ੁਰੂਆਤੀ ਸਮੱਗਰੀ ਤੋਂ ਸੁੱਕੇ ਐਬਸਟਰੈਕਟ ਦਾ ਝਾੜ 48.13% (w/w) ਸੀ।

 

2.2 ਮਾਤਰਾਤਮਕ ਉੱਚ-ਪ੍ਰਦਰਸ਼ਨ ਤਰਲ ਕ੍ਰੋਮੈਟੋਗ੍ਰਾਫੀ (HPLC) ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ

ਕ੍ਰੋਮੈਟੋਗ੍ਰਾਫਿਕ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਇੱਕ HPLC ਸਿਸਟਮ (ਵਾਟਰਸ ਕੰਪਨੀ, ਮਿਲਫੋਰਡ, MA, USA) ਅਤੇ ਇੱਕ ਫੋਟੋਡੀਓਡ ਐਰੇ ਡਿਟੈਕਟਰ ਨਾਲ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ। SDE ਦੇ HPLC ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਲਈ, ਪ੍ਰਮੁੱਖ-O-ਗਲੂਕੋਸਿਲਸੀਮੀਫਿਊਗਿਨ ਸਟੈਂਡਰਡ ਨੂੰ ਕੋਰੀਆ ਪ੍ਰਮੋਸ਼ਨ ਇੰਸਟੀਚਿਊਟ ਫਾਰ ਟ੍ਰੈਡੀਸ਼ਨਲ ਮੈਡੀਸਨ ਇੰਡਸਟਰੀ (ਗਯੋਂਗਸਨ, ਕੋਰੀਆ) ਤੋਂ ਖਰੀਦਿਆ ਗਿਆ ਸੀ, ਅਤੇਸਕਿੰਟ-ਓ-ਗਲੂਕੋਸਿਲਹਾਮਾਡੋਲ ਅਤੇ 4′-O-β-ਡੀ-ਗਲੂਕੋਸਿਲ-5-O-ਮੇਥਾਈਲਵਿਸਾਮਿਨੋਲ ਨੂੰ ਸਾਡੀ ਪ੍ਰਯੋਗਸ਼ਾਲਾ ਦੇ ਅੰਦਰ ਅਲੱਗ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ ਅਤੇ ਸਪੈਕਟ੍ਰਲ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਦੁਆਰਾ ਪਛਾਣਿਆ ਗਿਆ ਸੀ, ਮੁੱਖ ਤੌਰ 'ਤੇ NMR ਅਤੇ MS ਦੁਆਰਾ।

SDE ਨਮੂਨੇ (0.1 ਮਿਲੀਗ੍ਰਾਮ) 70% ਈਥਾਨੌਲ (10 ਮਿ.ਲੀ.) ਵਿੱਚ ਭੰਗ ਕੀਤੇ ਗਏ ਸਨ। ਕ੍ਰੋਮੈਟੋਗ੍ਰਾਫਿਕ ਵਿਭਾਜਨ ਇੱਕ XSelect HSS T3 C18 ਕਾਲਮ (4.6 × 250 mm, 5) ਨਾਲ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀμm, ਵਾਟਰਸ ਕੰਪਨੀ, ਮਿਲਫੋਰਡ, MA, USA)। ਮੋਬਾਈਲ ਪੜਾਅ ਵਿੱਚ 1.0 ਮਿ.ਲੀ./ਮਿੰਟ ਦੀ ਵਹਾਅ ਦਰ ਨਾਲ ਪਾਣੀ (ਬੀ) ਵਿੱਚ ਐਸੀਟੋਨਿਟ੍ਰਾਇਲ (ਏ) ਅਤੇ 0.1% ਐਸੀਟਿਕ ਐਸਿਡ ਸ਼ਾਮਲ ਹੁੰਦਾ ਹੈ। ਇੱਕ ਮਲਟੀਸਟੈਪ ਗਰੇਡੀਐਂਟ ਪ੍ਰੋਗਰਾਮ ਨੂੰ ਇਸ ਤਰ੍ਹਾਂ ਵਰਤਿਆ ਗਿਆ ਸੀ: 5% A (0 ਮਿੰਟ), 5–20% A (0–10 ਮਿੰਟ), 20% A (10–23 ਮਿੰਟ), ਅਤੇ 20–65% A (23–40 ਮਿੰਟ) ). ਖੋਜ ਵੇਵ-ਲੰਬਾਈ ਨੂੰ 210-400 nm 'ਤੇ ਸਕੈਨ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ ਅਤੇ 254 nm 'ਤੇ ਰਿਕਾਰਡ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ। ਟੀਕੇ ਦੀ ਮਾਤਰਾ 10.0 ਸੀμL. ਤਿੰਨ ਕ੍ਰੋਮੋਨਾਂ ਦੇ ਨਿਰਧਾਰਨ ਲਈ ਮਿਆਰੀ ਹੱਲ 7.781 mg/mL (ਪ੍ਰੀਮ-O-ਗਲੂਕੋਸਿਲਸੀਮੀਫਿਊਗਿਨ), 31.125 ਮਿਲੀਗ੍ਰਾਮ/ਐਮਐਲ (4′-O-β-ਡੀ-ਗਲੂਕੋਸਿਲ-5-O-ਮਿਥਾਈਲਵਿਸਾਮਿਨੋਲ), ਅਤੇ 31.125 ਮਿਲੀਗ੍ਰਾਮ/ਮਿਲੀ.ਸਕਿੰਟ-ਓ-ਗਲੂਕੋਸਿਲਹਾਮਾਉਡੋਲ) ਮੀਥੇਨੌਲ ਵਿੱਚ ਅਤੇ 4 ਡਿਗਰੀ ਸੈਲਸੀਅਸ ਤੇ ​​ਰੱਖਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।

2.3 ਸਾੜ ਵਿਰੋਧੀ ਗਤੀਵਿਧੀ ਦਾ ਮੁਲਾਂਕਣਵਿਟਰੋ ਵਿੱਚ

2.3.1 ਸੈੱਲ ਕਲਚਰ ਅਤੇ ਨਮੂਨਾ ਇਲਾਜ

RAW 264.7 ਸੈੱਲ ਅਮਰੀਕਨ ਟਾਈਪ ਕਲਚਰ ਕਲੈਕਸ਼ਨ (ATCC, Manassas, VA, USA) ਤੋਂ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕੀਤੇ ਗਏ ਸਨ ਅਤੇ 1% ਐਂਟੀਬਾਇਓਟਿਕਸ ਅਤੇ 5.5% FBS ਵਾਲੇ DMEM ਮਾਧਿਅਮ ਵਿੱਚ ਉਗਾਏ ਗਏ ਸਨ। ਸੈੱਲਾਂ ਨੂੰ 37 ਡਿਗਰੀ ਸੈਲਸੀਅਸ ਤਾਪਮਾਨ 'ਤੇ 5% CO2 ਦੇ ਨਮੀ ਵਾਲੇ ਮਾਹੌਲ ਵਿੱਚ ਪ੍ਰਫੁੱਲਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ। ਸੈੱਲਾਂ ਨੂੰ ਉਤੇਜਿਤ ਕਰਨ ਲਈ, ਮਾਧਿਅਮ ਨੂੰ ਤਾਜ਼ੇ DMEM ਮਾਧਿਅਮ ਨਾਲ ਬਦਲਿਆ ਗਿਆ ਸੀ, ਅਤੇ ਲਿਪੋਪੋਲੀਸੈਕਰਾਈਡ (LPS, ਸਿਗਮਾ-ਐਲਡਰਿਕ ਕੈਮੀਕਲ ਕੰਪਨੀ, ਸੇਂਟ ਲੁਈਸ, MO, USA) ਨੂੰ 1 ਤੇ.μg/mL ਨੂੰ SDE (200 ਜਾਂ 400) ਦੀ ਮੌਜੂਦਗੀ ਜਾਂ ਗੈਰਹਾਜ਼ਰੀ ਵਿੱਚ ਜੋੜਿਆ ਗਿਆ ਸੀμg/mL) ਵਾਧੂ 24 ਘੰਟਿਆਂ ਲਈ।

2.3.2 ਨਾਈਟ੍ਰਿਕ ਆਕਸਾਈਡ (NO), ਪ੍ਰੋਸਟਾਗਲੈਂਡਿਨ E2 (PGE2), ਟਿਊਮਰ ਨੈਕਰੋਸਿਸ ਫੈਕਟਰ- ਦਾ ਨਿਰਧਾਰਨα(TNF-α), ਅਤੇ Interleukin-6 (IL-6) ਉਤਪਾਦਨ

ਸੈੱਲਾਂ ਦਾ SDE ਨਾਲ ਇਲਾਜ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਅਤੇ LPS ਨਾਲ 24 ਘੰਟਿਆਂ ਲਈ ਉਤੇਜਿਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ। ਪਿਛਲੇ ਅਧਿਐਨ ਦੇ ਅਨੁਸਾਰ ਗ੍ਰੀਸ ਰੀਏਜੈਂਟ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਨਾਈਟ੍ਰਾਈਟ ਨੂੰ ਮਾਪ ਕੇ ਕੋਈ ਉਤਪਾਦਨ ਦਾ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਨਹੀਂ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ [12]। ਭੜਕਾਊ ਸਾਇਟੋਕਿਨਸ PGE2, TNF- ਦਾ ਭੇਦα, ਅਤੇ IL-6 ਨੂੰ ਨਿਰਮਾਤਾ ਨਿਰਦੇਸ਼ਾਂ ਦੇ ਅਨੁਸਾਰ ਇੱਕ ELISA ਕਿੱਟ (R&D ਸਿਸਟਮ) ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਨਿਰਧਾਰਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ। NO ਅਤੇ cytokine ਉਤਪਾਦਨ 'ਤੇ SDE ਦੇ ਪ੍ਰਭਾਵਾਂ ਨੂੰ Wallac EnVision ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੇ ਹੋਏ 540 nm ਜਾਂ 450 nm 'ਤੇ ਨਿਰਧਾਰਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।™ਮਾਈਕ੍ਰੋਪਲੇਟ ਰੀਡਰ (ਪਰਕਿਨ ਐਲਮਰ)।

2.4 Antiosteoarthritis ਗਤੀਵਿਧੀ ਦਾ ਮੁਲਾਂਕਣਵੀਵੋ ਵਿੱਚ

2.4.1 ਜਾਨਵਰ

ਨਰ ਸਪ੍ਰੈਗ-ਡੌਲੀ ਚੂਹੇ (7 ਹਫ਼ਤੇ ਪੁਰਾਣੇ) ਨੂੰ ਸਮਟਾਕੋ ਇੰਕ. (ਓਸਾਨ, ਕੋਰੀਆ) ਤੋਂ ਖਰੀਦਿਆ ਗਿਆ ਸੀ ਅਤੇ ਇੱਥੇ 12-ਘੰਟੇ ਦੇ ਰੋਸ਼ਨੀ/ਹਨੇਰੇ ਚੱਕਰ ਨਾਲ ਨਿਯੰਤਰਿਤ ਹਾਲਤਾਂ ਵਿੱਚ ਰੱਖਿਆ ਗਿਆ ਸੀ।°C ਅਤੇ% ਨਮੀ। ਚੂਹਿਆਂ ਨੂੰ ਪ੍ਰਯੋਗਸ਼ਾਲਾ ਖੁਰਾਕ ਅਤੇ ਪਾਣੀ ਪ੍ਰਦਾਨ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀਅਡ ਲਿਬਿਟਮ. ਸਾਰੀਆਂ ਪ੍ਰਯੋਗਾਤਮਕ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆਵਾਂ ਨੈਸ਼ਨਲ ਇੰਸਟੀਚਿਊਟ ਆਫ਼ ਹੈਲਥ (ਐਨਆਈਐਚ) ਦੇ ਦਿਸ਼ਾ-ਨਿਰਦੇਸ਼ਾਂ ਦੀ ਪਾਲਣਾ ਵਿੱਚ ਕੀਤੀਆਂ ਗਈਆਂ ਸਨ ਅਤੇ ਡੇਜੇਓਨ ਯੂਨੀਵਰਸਿਟੀ (ਡੇਜੀਓਨ, ਕੋਰੀਆ ਗਣਰਾਜ) ਦੀ ਪਸ਼ੂ ਦੇਖਭਾਲ ਅਤੇ ਵਰਤੋਂ ਕਮੇਟੀ ਦੁਆਰਾ ਮਨਜ਼ੂਰ ਕੀਤੀਆਂ ਗਈਆਂ ਸਨ।

2.4.2. ਚੂਹਿਆਂ ਵਿੱਚ MIA ਨਾਲ OA ਦੀ ਸ਼ਮੂਲੀਅਤ

ਅਧਿਐਨ ਦੀ ਸ਼ੁਰੂਆਤ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ ਜਾਨਵਰਾਂ ਨੂੰ ਬੇਤਰਤੀਬੇ ਅਤੇ ਇਲਾਜ ਸਮੂਹਾਂ ਨੂੰ ਸੌਂਪਿਆ ਗਿਆ ਸੀ (ਪ੍ਰਤੀ ਸਮੂਹ) MIA ਘੋਲ (3 ਮਿਲੀਗ੍ਰਾਮ/50μL ਦਾ 0.9% ਖਾਰਾ) ਨੂੰ ਕੇਟਾਮਾਈਨ ਅਤੇ ਜ਼ਾਈਲਾਜ਼ੀਨ ਦੇ ਮਿਸ਼ਰਣ ਨਾਲ ਪ੍ਰੇਰਿਤ ਅਨੱਸਥੀਸੀਆ ਦੇ ਅਧੀਨ ਸੱਜੇ ਗੋਡੇ ਦੇ ਅੰਦਰੂਨੀ ਹਿੱਸੇ ਵਿੱਚ ਸਿੱਧਾ ਟੀਕਾ ਲਗਾਇਆ ਗਿਆ ਸੀ। ਚੂਹਿਆਂ ਨੂੰ ਬੇਤਰਤੀਬੇ ਚਾਰ ਸਮੂਹਾਂ ਵਿੱਚ ਵੰਡਿਆ ਗਿਆ ਸੀ: (1) ਬਿਨਾਂ MIA ਟੀਕੇ ਵਾਲਾ ਖਾਰਾ ਸਮੂਹ, (2) MIA ਟੀਕੇ ਵਾਲਾ MIA ਸਮੂਹ, (3) MIA ਟੀਕੇ ਵਾਲਾ SDE-ਇਲਾਜ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸਮੂਹ (200 mg/kg), ਅਤੇ (4) ) ਇੰਡੋਮੇਥਾਸੀਨ- (IM-) ਇਲਾਜ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸਮੂਹ (2 ਮਿਲੀਗ੍ਰਾਮ/ਕਿਲੋਗ੍ਰਾਮ) MIA ਇੰਜੈਕਸ਼ਨ ਨਾਲ। ਚੂਹਿਆਂ ਨੂੰ 4 ਹਫ਼ਤਿਆਂ ਲਈ MIA ਇੰਜੈਕਸ਼ਨ ਤੋਂ 1 ਹਫ਼ਤਾ ਪਹਿਲਾਂ SDE ਅਤੇ IM ਨਾਲ ਜ਼ੁਬਾਨੀ ਤੌਰ 'ਤੇ ਲਗਾਇਆ ਗਿਆ ਸੀ। ਇਸ ਅਧਿਐਨ ਵਿੱਚ ਵਰਤੀ ਗਈ SDE ਅਤੇ IM ਦੀ ਖੁਰਾਕ ਪਿਛਲੇ ਅਧਿਐਨਾਂ ਵਿੱਚ ਨਿਯੁਕਤ ਕੀਤੇ ਗਏ ਲੋਕਾਂ 'ਤੇ ਅਧਾਰਤ ਸੀ।10,13,14].

2.4.3 ਹਿੰਡਪਾ ਵਜ਼ਨ-ਬੇਅਰਿੰਗ ਡਿਸਟਰੀਬਿਊਸ਼ਨ ਦੇ ਮਾਪ

OA ਸ਼ਾਮਲ ਕਰਨ ਤੋਂ ਬਾਅਦ, ਹਿੰਡਪੌਜ਼ ਦੀ ਭਾਰ ਚੁੱਕਣ ਦੀ ਸਮਰੱਥਾ ਵਿੱਚ ਅਸਲ ਸੰਤੁਲਨ ਵਿਗਾੜਿਆ ਗਿਆ ਸੀ। ਇੱਕ ਅਸਮਰੱਥਾ ਟੈਸਟਰ (ਲਿਨਟਨ ਇੰਸਟਰੂਮੈਂਟੇਸ਼ਨ, ਨਾਰਫੋਕ, ਯੂਕੇ) ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਭਾਰ ਸਹਿਣਸ਼ੀਲਤਾ ਵਿੱਚ ਤਬਦੀਲੀਆਂ ਦਾ ਮੁਲਾਂਕਣ ਕਰਨ ਲਈ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ। ਚੂਹਿਆਂ ਨੂੰ ਧਿਆਨ ਨਾਲ ਮਾਪਣ ਵਾਲੇ ਕਮਰੇ ਵਿੱਚ ਰੱਖਿਆ ਗਿਆ ਸੀ। ਪਿਛਲੇ ਅੰਗ ਦੁਆਰਾ ਵਰਤੇ ਗਏ ਭਾਰ-ਸਹਿਣ ਵਾਲੀ ਸ਼ਕਤੀ ਨੂੰ 3 ਸੈਕਿੰਡ ਦੀ ਮਿਆਦ ਵਿੱਚ ਔਸਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ। ਵਜ਼ਨ ਵੰਡ ਅਨੁਪਾਤ ਦੀ ਗਣਨਾ ਨਿਮਨਲਿਖਤ ਸਮੀਕਰਨ ਦੁਆਰਾ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ: [ਸੱਜੇ ਪਿਛਲੇ ਅੰਗ 'ਤੇ ਭਾਰ/(ਸੱਜੇ ਪਿਛਲੇ ਅੰਗ 'ਤੇ ਭਾਰ + ਖੱਬੇ ਪਿਛਲੇ ਅੰਗ 'ਤੇ ਭਾਰ)] × 100 [15].

2.4.4. ਸੀਰਮ ਸਾਈਟੋਕਾਈਨ ਦੇ ਪੱਧਰਾਂ ਦੇ ਮਾਪ

ਖੂਨ ਦੇ ਨਮੂਨੇ 1,500 ਗ੍ਰਾਮ 'ਤੇ 10 ਮਿੰਟ ਲਈ 4°C 'ਤੇ ਕੇਂਦਰਿਤ ਕੀਤੇ ਗਏ ਸਨ; ਫਿਰ ਸੀਰਮ ਨੂੰ ਇਕੱਠਾ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਅਤੇ ਵਰਤੋਂ ਤੱਕ −70°C 'ਤੇ ਸਟੋਰ ਕੀਤਾ ਗਿਆ। IL-1 ਦੇ ਪੱਧਰβ, IL-6, TNF-α, ਅਤੇ ਸੀਰਮ ਵਿੱਚ PGE2 ਨੂੰ ਨਿਰਮਾਤਾ ਨਿਰਦੇਸ਼ਾਂ ਅਨੁਸਾਰ R&D ਸਿਸਟਮਾਂ (ਮਿਨੀਏਪੋਲਿਸ, MN, USA) ਤੋਂ ELISA ਕਿੱਟਾਂ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਮਾਪਿਆ ਗਿਆ ਸੀ।

2.4.5 ਰੀਅਲ-ਟਾਈਮ ਮਾਤਰਾਤਮਕ RT-PCR ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ

ਕੁੱਲ RNA ਨੂੰ TRI reagent® (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੇ ਹੋਏ ਗੋਡਿਆਂ ਦੇ ਜੋੜਾਂ ਦੇ ਟਿਸ਼ੂ ਤੋਂ ਕੱਢਿਆ ਗਿਆ ਸੀ, ਸੀਡੀਐਨਏ ਵਿੱਚ ਉਲਟ-ਲਿਪੀਬੱਧ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ ਅਤੇ SYBR ਗ੍ਰੀਨ (ਅਪਲਾਈਡ ਬਾਇਓਸਿਸਟਮ) ਦੇ ਨਾਲ ਇੱਕ ਟੀਐਮ ਵਨ ਸਟੈਪ ਆਰਟੀ ਪੀਸੀਆਰ ਕਿੱਟ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਪੀਸੀਆਰ-ਐਪਲੀਫਾਈ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ। , Grand Island, NY, USA)। ਰੀਅਲ-ਟਾਈਮ ਮਾਤਰਾਤਮਕ ਪੀਸੀਆਰ ਅਪਲਾਈਡ ਬਾਇਓਸਿਸਟਮ 7500 ਰੀਅਲ-ਟਾਈਮ ਪੀਸੀਆਰ ਸਿਸਟਮ (ਅਪਲਾਈਡ ਬਾਇਓਸਿਸਟਮ, ਗ੍ਰੈਂਡ ਆਈਲੈਂਡ, NY, ਯੂਐਸਏ) ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ। ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਕ੍ਰਮ ਅਤੇ ਪੜਤਾਲ-ਕ੍ਰਮ ਸਾਰਣੀ ਵਿੱਚ ਦਰਸਾਏ ਗਏ ਹਨ1. ਨਮੂਨਾ cDNAs ਦੇ ਅਲੀਕੋਟਸ ਅਤੇ GAPDH cDNA ਦੀ ਬਰਾਬਰ ਮਾਤਰਾ ਨੂੰ ਨਿਰਮਾਤਾ ਨਿਰਦੇਸ਼ਾਂ (ਅਪਲਾਈਡ ਬਾਇਓਸਿਸਟਮ, ਫੋਸਟਰ, CA, USA) ਦੇ ਅਨੁਸਾਰ ਡੀਐਨਏ ਪੋਲੀਮੇਰੇਜ਼ ਵਾਲੇ TaqMan® ਯੂਨੀਵਰਸਲ PCR ਮਾਸਟਰ ਮਿਸ਼ਰਣ ਨਾਲ ਵਧਾਇਆ ਗਿਆ ਸੀ। ਪੀਸੀਆਰ ਦੀਆਂ ਸਥਿਤੀਆਂ 40 ਚੱਕਰਾਂ ਲਈ 50°C 'ਤੇ 2 ਮਿੰਟ, 94°C 'ਤੇ 10 ਮਿੰਟ, 95°C 'ਤੇ 15 s, ਅਤੇ 60°C 'ਤੇ 1 ਮਿੰਟ ਸਨ। ਨਿਰਮਾਤਾ ਨਿਰਦੇਸ਼ਾਂ ਦੇ ਅਨੁਸਾਰ, ਟੀਚੇ ਦੇ ਜੀਨ ਦੀ ਤਵੱਜੋ ਨੂੰ ਤੁਲਨਾਤਮਕ Ct (ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਪਲਾਟ ਅਤੇ ਥ੍ਰੈਸ਼ਹੋਲਡ ਦੇ ਵਿਚਕਾਰ ਕਰਾਸ-ਪੁਆਇੰਟ 'ਤੇ ਥ੍ਰੈਸ਼ਹੋਲਡ ਚੱਕਰ ਨੰਬਰ) ਵਿਧੀ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਨਿਰਧਾਰਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।

FOB ਕੀਮਤ:US $0.5 - 9,999 / ਟੁਕੜਾ

ਘੱਟੋ-ਘੱਟ ਆਰਡਰ ਦੀ ਮਾਤਰਾ:100 ਟੁਕੜੇ/ਟੁਕੜੇ

ਸਪਲਾਈ ਦੀ ਸਮਰੱਥਾ:10000 ਟੁਕੜਾ/ਪੀਸ ਪ੍ਰਤੀ ਮਹੀਨਾ